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如何选择高效液相色谱柱

日期:2020-06-01 09:34
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摘要:如何选择高效液相色谱柱 1、正相色谱 正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(ZH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。 由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强落的组份*先被冲洗出色谱柱。 正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform)二氯甲烷(Methylence Chloride)等. 2、反相色谱 反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对教弱的官能团的键合相。 反相色谱...
如何选择高效液相色谱柱
1、正相色谱
正相色谱用的固定相通常为硅胶(Silica),以及其他具有极性官能团,如胺基团(ZH2,APS)和氰基团(CN,CPS)的键合相填料。
由于硅胶表面的硅羟基(SiOH)或其他团的极性教强,因此,分离的次序是依据样品中的各组份的极性大小,即极性强落的组份*先被冲洗出色谱柱。
正相色谱使用的流动相极性相对比固定相低,如:正乙烷(Hexane),氯(Chloroform)二氯甲烷(Methylence Chloride)等.
2、反相色谱
反相色谱填料常是以硅胶为基础,表面键合有极性相对教弱的官能团的键合相。
反相色谱所使用的流动相极性教强,通常为水,缓冲液与甲醇,已腈等混合物。
样品流出色谱柱的顺序是极性教强组合*先被冲出,而极性弱的组份会在色谱柱上有更强的保留。
常用的反相填料有C18(ODS) C8(MOS)。C4(B)C6H5(Phenyl)等。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx
3、聚合物填料:
聚合物调料多为聚苯乙烯-二乙烯基苯或聚甲基丙酸至等,其主要优点是在PG值为1-14均可使用。
相对与硅胶基质的C18填料,这类填料具有更强的淑水性;大孔的聚合物填料对蛋白质等样品的分离非常有效。
现在的聚合物填料的缺点是相对硅胶基质填料,色谱柱柱效教低。
4、其他无机填料
其它HPLC的无机填料色谱柱也已经商品化。由于其特殊的性质,一般**于特殊的用途。如墨化碳也用于正逐渐成为反相色谱填料。这种填料的分离不同与硅胶基质烷基键合相,石墨化碳的表面即是保留的基础,不再需其它的表面改性,该柱填料一般比烷基键合硅胶或多孔聚合物填料的保留能力更强,石墨化碳可用于分离某些几何导构体,又由于HPLC流动相中不会被溶解,这类柱可在任何PH与温度下使用。氧化铝也可用于HPLC,氧化铝微粒刚性强,可制成稳定的色谱柱柱床,其优点是可在PH高达12的流动相中使用。但由于氧化铝与碱性化合物作用也很强,应用范围受到一定的限制,所以未能广泛应用,新型氧化诰填料也可用于   HPLC,商品化的仅有聚合物涂层的多孔氧化诰微球色谱柱,应用PH范围1~14,温度可达到1000C。由于氧化诰填料几年才开始研究,加之前的实验难度,其重要用途与优势尚在进行中。http://www.ba17.com/LC-Column/Category380.aspx

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