色譜柱的注意事項

色譜柱的注意事項

     1、保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇，柱接頭要擰緊，防止溶劑揮發乾燥。**禁止將緩衝溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。

     2、色譜柱使用過程中，如果壓力升高，一種可能是燒結濾片被堵塞，這時應更換濾片或將其取出進行清洗；另一種可能是大分子進入柱內，使柱頭被汙染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現塌陷，死體積增大。在後兩種情況發生時，小心擰開柱接頭，用潔淨小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度（注意把被汙染填料取淨）再把柱內填料整平。然後用適當溶劑濕潤的固定相（與柱內相同）填滿色譜柱，壓平，再擰緊柱接頭。這樣處理後柱效能得到改善，但是很難恢複到新柱的水平。柱子失效通常是柱端部分，在分析柱前裝一根與分析柱相同固定相的短柱（5~30mm），可以起到保護、延長柱壽命的作用。采用保護柱會損失一定的柱效，這是值得的。

      通常色譜柱壽命在正確使用時可達2年以上。以矽膠為基質的填料，隻能在pH2~9範圍內使用。柱子使用一段時間後，可能有一些吸附作用強的物質保留於柱頂，特彆是一些有色物質更易看清被吸著在柱頂的填料上。新的色譜柱在使用一段時間後柱頂填料可能塌陷，使柱效下降，這時也可補加填料使柱效恢複。每次工作完後，*好用洗脫能力強的洗脫液衝洗，例如ODS柱宜用甲醇衝洗至基線平衡。當采用鹽緩衝溶液作流動相時，使用完後應用無鹽流動相衝洗。含鹵族元素（氟、氯、溴）的化合物可能會腐蝕不鏽鋼管道，不宜長期與之接觸。裝在HPLC儀上柱子如不經常使用，應每隔4~5天開機衝洗15分鐘。